不同稀释粉对种公猪精液保存效果的影响

2014-12-05 10:22:02 来源：

摘要：本试验比较研究了三个品种种猪精液品质的差异及不同精液稀释粉对精液常温保存（17℃）效果的影响。试验选取27头法系种公猪，其中杜洛克7头、长白8头、大白12头。结果显示杜洛克种公猪的采精量最多，为260.9±35.6mL，但与长白和大白种公猪采精量差异不显著，三个品种公猪的精子活力也没有显著差异。同时，本试验还选取了市场常用的7个品牌的稀释粉进行比较试验，效果最好的是全能健®Z稀释粉，其保存天数在9天以上，稀释后精子不易沉淀。稀释粉B效果最差，稀释后精液保存时间小于48h。

关键词：种公猪；人工授精；稀释液；精子活力

随着集约化养猪的发展，大型规模化猪场的增多，越来越多的规模化猪场重视猪场种群改良。利用人工授精技术能够快速有效实现猪场种群的改良，将优良公猪的基因迅速推广，促进种猪品种品系改良和商品猪生产性能的提高；还能降低生产成本，节省人力物力等优势，因此近年来猪人工授精技术得到大范围应用和推广。利用常温保存的精液进行输精时，对收集精液的稀释处理是保持精液活力重要环节，而公猪精液的特殊性决定了经过稀释后的精子不但要保存本身的授精能力，还要延长自身存活时间，所以对稀释剂的要求较高[1]。因此，选择合适的稀释粉对保证稀释后精液的品质非常重要。

目前在我国市场上销售的猪精液稀释粉品牌繁多，达二三十种，到底哪种稀释粉效果更好，各家说法不一，养殖场在选择稀释粉时很难正确判断。本试验选取了市场销售常用的7种猪精液稀释粉进行对比试验，为养殖场在选择精液稀释粉时提供参考和依据。

1 试验材料与方法

1.1 试验动物

试验于2013年3 ~7月份在陕西省原种猪场进行，试验选用27头法系种猪，其中杜洛克7头、长白8头、大白12头，公猪年龄均在9月龄以上。公猪按照常规饲养方法进行饲养管理，生长发育正常。

1.2 试验主要试剂与仪器

蒸馏水，伊红染色剂，75％酒精，从市场选购不同品牌的商品稀释粉如下：

稀释粉品种	名称	说明
短效稀释粉	稀释粉Ⅰ、稀释粉Ⅱ、稀释粉Ⅲ、稀释粉Ⅳ
长效稀释粉	稀释粉A、稀释粉B、全能健^®Z	稀释粉B为该场原使用产品

主要仪器：电子分析天平、恒温显微镜、恒温预热器、水浴锅、消毒柜、温度计，恒温冰箱，红细胞计数板、5mL、10mL离心管若干，5mL一次性注射器若干，记号笔。

1.3 试验设计

试验一：选取杜洛克5头，长白6头，大白10头，每头种公猪采精后，量取精液体积，检测原精液活力品质和活力，使用该场原使用稀释粉B对精液进行稀释，在17℃条件下保存5天，每天测定精子活力。

试验二：比较短效稀释粉（稀释粉Ⅰ、稀释粉Ⅱ、稀释粉Ⅲ、稀释粉Ⅳ）与原场使用稀释粉B的差异，在17℃条件下保存5天，每天测定精子活力，每组试验8个重复。

试验三：选取两种长效稀释粉，全能健^®Z、稀释粉A与该场原使用稀释粉B，在17℃条件下保存9天，每天测定精子活力，每组试验2个重复。

1.4 试验方法

1.4.1稀释粉的溶解

与精液接触的所有试验用器具使用电热鼓风干燥箱干燥消毒，稀释液用双蒸水配制。稀释液的配制按照各自产品说明进行操作，配制好的稀释液放入37℃恒温水浴锅中待用。

1.4.2精液的采集

人工采集公猪精液，采集时注意卫生，避免精液污染。精液采集好后立刻送到实验室进行检测和稀释。

1.4.3精液的稀释与保存

采用气味和色泽正常、活力在70%以上的精液，废弃活力低于70%的精液。根据精液的密度计算稀释比例，保证稀释后每精液的有效精子密度≥40亿/80ml，缓慢将稀释液加到精液中，稀释后的精液分装保存于17℃的恒温箱内。

1.4.4精液精子活力的测定

精子活力的测定采用目测法。每天定时检查精液，检查前先把精液摇匀，再用一次性注射器从精液瓶内吸取1毫升精液，在37℃恒温水浴中升温10分钟。然后将升温后的精液滴在预热到37℃的载玻片上，盖好盖玻片后，在160倍显微镜下检测精子活力。

1.5统计分析

试验数据使用SPSS 13.0统计软件进行显著性检验，数据结果以平均值±标准差的形式表示，以P<0.05作为差异显著性的判断标准。

2 试验结果

2.1 不同品种猪精液量与稀释保存情况的比较

本试验结果表明杜洛克的采精量略大于长白和大白，但差异不显著，如表1所示。不同品种猪精液稀释后，17℃条件下保存精子活力的结果如表2，可以看出杜洛克、长白和大白三种猪原精液活力没有显著的差异。经过稀释粉B稀释保存5天内，杜洛克稀释后精液的精子活力均大于长白和大白，但差异不显著。由表2可知，不同品种的种猪精液，在稀释粉B保存下，保存到第2天精子活力都降至60%以下，但杜洛克每天精子活力的下降要比长白和大白更缓慢，大白和长白保存5天内每天的精子活力下降明显（P<0.05）。

表1 不同品种猪精液采集量比较

Table 1 Comparison of semen quantity in different boars

项目	杜洛克	长白	大白
采精量/ml	260.9±35.6	187.7±16.7	183.2±23.7

表2 不同品种种猪精液在同种稀释粉中17℃保存精子活力的比较

Table 2 Comparison of different boar sperm motility in the same diluents at 17℃, %

保存时间/d	杜洛克	长白	大白
原精液活力	76.0±6.6^A	80.0±2.2^AB	69.2±2.4^B
2	59.0±6.6^C	50.5±14.1^CD	38.3±8.2^D
4	31.0±10.0^E	22.0±13.0^EF	15.0±7.9^F

注：同列不同大写字母（A、B、C、D、E、F）表示差异显著（P<0.05），同行不同的大写字母(X、Y、Z)表示差异显著（P<0.05），下同。

In the same column different capital letter BDFY17

P>0.05稀释粉Ⅰ稀释粉ⅢBB表3 不同短效期稀释对猪精液17℃保存下精子活力的影响

Table 3 Effect of different short acting diluents on boar sperm motility at 17℃, %

保存时间/d	稀释粉Ⅰ	稀释粉Ⅱ	稀释粉Ⅲ	稀释粉Ⅳ	稀释粉B
原精液活力	76.9±4.6^A	75.0±7.6^A	75.0±4.6^{B X}	61.9±3.7^{B XY}	58.1±6.8^{B Z}
2	61.9±4.6^{BC Y}	58.8±5.6^{BC Y}	37.5±7.07^{C X}	46.9±4.4^{CD X}	50.6±10.3^{D Y}
4	43.8±11.0^{D Y}	48.8±7.6^{CD X}	14.5±9.9^{D XY}	30.6±8.2^{E X}	44.4±4.8^{F Z}

P>0.0595A60%AP<0.05AP<0.05®Z7224

表4 不同长效期精液稀释对猪精液17℃保存下精子活力的影响

Table 4 Effect of different long acting diluents on boar sperm motility at 17℃, %

保存时间/d	全能健^®Z	稀释粉A	稀释粉B
原精液活力	90.0±7.1^A	85.0±10.6^BC	75.0±7.1^B
1	80.0±0.0^{A X}	55.0±7.1^{BC X}	70.0±0.0^{D Y}
3	85.0±7.1^{ABC Y}	30.0±0.0^{ABC X}	65.0±0.0^{D Z}
5	80.0±7.1^{ABC Y}	30.0±7.1^{BC X}	65.0±7.1^{D Y}
7	70.0±7.1^{BC Y}	20.0±0.0^{CD X}	55.0±0.0^{D Z}
9	60.0±2.1^{C XY}	10.0注：同表2。 3 讨论 3.1 不同品种公猪精液的采精量和精子活力 >>>Park0.5[5-6][7]P>0.05[3]P>0.05[4][10-11] 172~37®Z>粉A>稀释粉Ⅲ>稀释粉Ⅳ>稀释粉Ⅱ>稀释粉B。其中效果最好的是全能健^®Z稀释粉，其保存天数在9天以上，在稀释精液存放过程中精子不易沉淀。而稀释粉B保存时间和效果严重依赖原精液的品质，当精液稍差时，该稀释粉几乎不能保存到48h。因此对于规模化的猪场人工授精选择长效期稀释粉全能健^®Z，能够延长精液保存时间，保证精液精子活力，提高母猪受胎率和生产性能，提高猪场经济效益。 4 小结 1. 2.效果最好的是全能健^®Z，其保存天数在9天以上，且稀释后精子不易沉淀。

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